Vaccini mRNA “Fatti in Casa”: è Possibile?


**تجد النص العربي في نهاية المقال – بعد الرسم التوضيحي**

https://www.facebook.com/groups/influenzasconosciuta/permalink/1814490115386152/

I vaccini Pfizer e Moderna #COVID19Vaccini sono vaccini a mRNA incapsulati in nanoparticelle lipidiche (LNP). 

* nota: NANO significa NANOmetro che è un miliardesimo di metro. Quindi, è l’unità di misura, NON ci si riferisce a chip digitale / elettrico!

Qui di seguito l’elenco ingredienti:

1) ingrediente attivo (mRNA)

2) lipidi

3) buffer (soluzione tampone)

4) saccarosio

Lo scopo di questo articolo è spiegare “l’ingrediente attivo” di questi vaccini che è la molecola di “mRNA“. 

Come funziona il vaccino?

Il vaccino funziona simulando un “attacco” da agente esterno al corpo. Quindi, il tuo sistema immunitario riceve e memorizza gli “antigeni estranei (non-self)” forniti artificialmente attraverso vaccinazione PRIMA che entrino nel corpo in modo naturale.

Antigene, cosa significa?

In questo gruppo abbiamo ne abbiamo già parlato altre volte. Vedi questo post ben illustrato (https://www.facebook.com/groups/influenzasconosciuta/permalink/1678367275665104/).

ANTIGENE = ANTIbodies GENErating. Quindi, QUALSIASI molecola che genera la risposta immunitaria è antigenica. Gli antigeni sono principalmente PROTEINE in natura, ma possono anche essere lipidi, RNA, DNA, polisaccaridi … ecc.

Tipi dei vaccini

i vecchi vaccini classici lavoravano sulla produzione di vaccini vivi attenuati rispetto a vaccini uccisi inattivati (la generazione x era l’ultima a ricevere questo tipo di vaccini).

D’altra parte, i millennial hanno colpi diversi (sintetizzati, inattivati, sub-unità … ecc.). Ora, l’mRNA rivoluziona tutto. La domanda che le persone fanno più spesso: 

PERCHÉ ORA mRNA MA NON 50 anni fa?

La risposta è semplice: l’RNA è una molecola fragile e instabile. Questo l’ha resa “una male” candidata per la produzione di vaccini. Una volta risolto il problema dell’instabilità, l’era della piattaforma fiorisce

DNA –> RNA –> Proteina

Come avevo spiegato in diversi post prima, la proteina Spike (S) del coronavirus SARS-CoV-2 (il virus che causa COVID-19) è stata identificata quale bersaglio ottimale per la produzione del vaccino.

Mentre aziende come Novavax hanno lavorato duramente per realizzare questa proteina spike come prodotto finale (altri racconti nei prossimi post), altre come Pfizer e Moderna si sono concentrate sullo sviluppo del pezzo di mRNA.

mRNA insegna alle cellule umane a produrre proteina spike.

Allora, da dove proveniva l’mRNA nel vaccino Pfizer o Moderna?   

La biologia molecolare è molto complicata. Non vorrei che si smetta di leggere rapidamente a causa della scienza arida in esso. Qui, vorrei semplificare il più possibile. Immagina solo l’mRNA come un vagone di un TRENO. I vagoni sono i nucleotidi U,A, G, e C.

Quando un RNA “esterno” (non auto) entra nella cellula, la cellula umana riconoscerà immediatamente alcuni strani cavalieri e avviserà il sistema immunitario di cacciarli. Ci sono voluti decenni per apprendere che il vagone U è quello piu’ facilmente riconosciuto, quindi i ricercatori hanno modificato il vagone U in “pseudo U[Ψ] (1-methyl-3’-pseudouridylyl).

Ψ: pseudo U

Questa è una modifica che “elude” con successo la risposta immunitaria, per dare tempo all’mRNA sconosciuto, una volta entrato nelle nostre cellule, di essere tradotto in proteina.

Un’altra importante modifica è stata quella di proteggere entrambe le estremità dell’mRNA dalla degradazione da parte degli enzimi cellulari.

L’analogo di 5’ cap può essere aggiunto sia post- o co-trascrizione. In generale, il metodo co-trascrizionale è più adatto ai processi industriali.

Per proteggere la fine dell’mRNA aggiungiamo, al messaggio, una coda poli(A) codificandola nel modello di DNA o utilizzando una poli(A) polimerasi.

Se si studiano le sequenze in mRNA Pfizer e Moderna, si potranno notare due cose:

1)– la lunghezza della coda del poli(A) è diversa e

2)– mentre Pfizer ha 2 codoni di stop, Moderna ne ha 3. 

Cosa sono i codoni di stop?

Cosa sono le altre parti all’interno delle sequences come Sig. UTR ecc?

CureVac è vaccino ad mRNA vaccino, pero è “piu naturale”, che significa? 

Continua …

****** Continua la prossima settimana ************

Per favore, se hai notato errori di battitura o grammaticali, fammelo sapere. GRAZIE!

https://github.com/NAalytics/Assemblies-of-putative-SARS-CoV2-spike-encoding-mRNA-sequences-for-vaccines-BNT-162b2-and-mRNA-1273/blob/main/Assemblies%20of%20putative%20SARS-CoV2-spike-encoding%20mRNA%20sequences%20for%20vaccines%20BNT-162b2%20and%20mRNA-1273.docx.pdf

تعمل لقاحات شركتَيْ مودرنا وفايرز المضادّة لكوفيد-19 على مبدأ تكوين مناعة ضدّ كوفيد-19 من خلال تقنيّة أجزاء الحمض النوويّ المرسال الريبوزيّ (ستتمّ الإشارة إليه بالحمض النوويّ المرسال) المغلّفة في جُسَيْماتٍ دهنيّةٍ نانويّةٍ.

النانو وحدة قياس طول والتي تعتبر جزءًا من المليار من المتر، وتستخدم في قياس الجسيمات المتناهية في الصغر.

تتكوّن تلك اللقاحات من الموادّ الآتية:

  1. الحمض النوويّ المرسال.
  2. الغلاف الدهنيّ.
  3. محلول منظّم للأس الهيدروجينيّ.
  4. سكّروز.

الهدف من هذه المقالة هو شرح المكوّن الفعّال للّقاحات السابقة، وهو جُزَيْء الحمض النوويّ المرسال.

كيف يعمل اللّقاح؟

يعمل اللّقاح من خلال خداع الجهاز المناعيّ بحضور الفيروس، ما يحفّز الجهاز المناعيّ بإنتاج مستضدّاتٍ والتي تسهّل عليه التعرّف إلى الفيروس الحقيقيّ، في حال حدوث العدوى بسبب الفيروس الحقيقيّ، والقضاء عليه مبكرًا قبل أن يصيب جميع الأعضاء والأجهزة البشريّة.

مستضدّات، ماذا تعني؟

تمّت مناقشة هذا المصطلح سابقًا ويمكن الدخول إلى هذا الرابط للمزيد من التّوضيح:

(https://www.facebook.com/groups/influenzasconosciuta/permalink/1678367275665104/).

المستضدّات عبارةٌ عن أيّ جسمٍ أو مركّبٍ كيميائيٍّ (كربوهيدرات، بروتين، سكّريات، أحماض نوويّة، دهون، إلخ…) قادرٍ على تحفيز الجهاز المناعيّ.

أنواع اللّقاحات:

تعمل اللّقاحات القديمة على فكرة الفيروس المضعّف (قادر على إثارة الجهاز المناعيّ ولكن مع احتماليّةٍ ضئيلةٍ جدًّا للتسبّب بالمرض مقارنةً مع الفيروس العاديّ)، بحيث إنّ مواليد الستينات إلى الثمانينات تلقّوا تلك الأنواع من اللقاحات. أمّا بالنسبة للأجيال اللّاحقة؛ أمثال جيل الألفيّة فتلقّوا تقنيّات أحدث من اللّقاحات ( فيروس معطّل، أجزاء محدّدة من الفيروس، إلخ…).

لماذا استُخدِمَت تقنيّة الحمض النوويّ المرسال الآن وليس قبل 50 سنة؟

الإجابة بسيطةٌ، لأنّ جُزَيْء الرنا حسّاسٌ وغير مستقرٍّ، فيتفكّك ويتحلّل بسرعةٍ عندما لا يُخزّن في الظروف المناسبة؛ ولذلك لم يكن أفضل مرشّح كمنصّةٍ لتكوين اللّقاحات. وإذا استطعت أن تحلّ مشكلة عدم الثبات الكيميائيّ لهذا الجُزَيْء واستقراره  فقد بدأت طفرةً هائلةً في مجال إنتاج المنصّات.

حمض نوويّ ريبوزي منقوص الأكسجين ˂ حمض نوويّ ريبوزيّ ˂ بروتين

كما ناقشت في منشوراتٍ سابقةٍ، أفضل جُزَيْء يمكن استهدافه من قبل لقاحات كوفيد-19 هو البروتين الشوكيّ لفيروس سارس كوف-2 المسبّب لمرض كوفيد-19. عملت شركة نوفافاكس جاهدةً على إنتاج المركّب النهائيّ والكامل للبروتين الشوكيّ، أمّا الشركات أخرى؛ مثال فايزر ومودرنا، فقامتا بتصنيع جزءٍ من الحمض النوويّ المرسال المسؤول عن إنتاج البروتين الشوكيّ الفيروسيّ داخل الخلايا البشريّة السليمة.

ولكن، من أين أتى الحمض النوويّ المرسال الذي تمّ تصنيعه من قبل شركتي فايزر ومودرنا؟

 نظرًا إلى أنّ علم الأحياء الجُزَيْئيّ معقّدٌ جدًّا، سأضطرّ إلى أن أكتفي بهذا القدر ذاكرةً بعض النقاط المختصرة وبشكلٍ ميسّرٍ. تخيّلوا أنّ الحمض النوويّ المرسال عبارةً عن عربات قاطرة، والعربات هي أجزاء الحمض النوويّ التي تُعْرَف بالنيوكلوتيدات، وهي أربعة أجزاء يتمّ الإشارة إليها بالأحرف الآتية: “ياء”، “ألف”، “جيم”، “سين”. عندما تصل عربة أو نيوكلوتيد (غير مألوفة) في قاطرة الحمض النوويّ المرسال إلى الخليّة البشريّة، تتعرّف الخليّة البشريّة إليها مباشرةً، ما يُحفّز الجهاز المناعيّ للتعرّف إليها وتدميرها سريعًا. قضينا عقود طوال لمعرفة أنّ العربة أو النيوكلوتيد “ياء” أسهل جُزَيْء يمكن تعديله لخداع الخلايا والجهاز المناعيّ، لذلك أعاد الباحثون تركيب ذلك المركّب، وسُمِّيَ بالياء الوهميّ (الاسم الكيميائيّ للمركّب/ 1- ميثييل-3’ سيودويوريديلايل-

Ψ: pseudo U.

بحيث إنّ هذا التعديل البسيط في ذلك النيوكلوتيد (أو أحد أهمّ عربات قاطرة الحمض النووي المرسال) أدّى إلى خداع الجهاز المناعيّ لكي يتأخّر في التعرّف إليه، حيث تدخل القاطرة إلى الخلايا والبدء بإنتاج البروتين الشوكيّ. ولإعادة برمجة تلك القاطرة أهميّةٌ كُبرى؛ حيث تحفظ الحمض النوويّ المرسال داخل الخليّة البشريّة من الإنزيمات الخلويّة التي تهضمها، ما يدفعها إلى أخذ وقتها في إنتاج البروتينات بكميّاتٍ كافيةٍ.

يمكن إضافة الجزء المناظر للقبّعة 5‘ إلى مرحلة ما بعد النسخ البروتينيّ أو كناسخٍ معاونٍ. عمومًا، طريقة النسخ المعاون تناسب الإنتاج الدوائيّ على نطاقٍ اوسع من طريقة مرحلة ما بعد النسخ البروتينيّ. ومن أجل حماية الجزء الأخير من قاطرة الحمض النوويّ المرسال، تُضاف عربةٌ جديدةٌ من المركّبات تدعى متعدّد السكريّات )بولي (“ألف” في قالب الحمض النوويّ الريبوزيّ منقوص الأكسجين “للتبسيط: المخطّط الهيكليّ الأزرق لبناء القاطرة” أو من خلال استخدام بولي “ألف” بوليميريز.

لو دقّقنا على تركيبة لقاحات الحمض النووي المرسال لفايزر ومودرنا لرأينا أمرَيْن يميّزانهما:

  1. اختلافًا ملحوظًا في طول المركب بولي “ألف“.
  2. لدي فايزر كودونان لإيقاف إنتاج البروتينات، أما مودرنا فلديها ثلاثة كودونات.

ما هي كودونات الإيقاف؟

في سلسلة اللّقاح أجزاء أخرى (أو القاطرة) غير مذكورةٍ في المقالة، ما هي؟ وما فائدتها؟

شركة كيورفاك تنتج لقاح حمض نوويّ مرسال أيضًا، لكنّه أقرب للطبيعة من فايزر ومودرنا، ما معنى ذلك؟

يتبع ….

– لا تنس تقييم الصفحة بنجمة واحدة أو أكثر –

– لا تنس إلقاء نظرة على مقالات سابقة –

– شارك ، وشكرا لمرورك العطر –

Sputnik V, J&J ed Astrazeneca/Oxford #COVID19vaccini: Come Sono Stati Realizzati


 

لا ترغب بتحميل ملف ؟ حسنا : تجدها هنا

ENGLISH ABSTRACT

Adenoviruses have been excellent vectors for delivering genes for gene therapy and vaccine antigens for decades. This is what we know as a viral vector-based vaccine platform; VV-based).

  • What are adenoviruses?
  • Why did we choose them for vaccine development?
  • How was the first generation of adenovirus vaccines designed?
  • RCA can be a safety issue in VV-based vaccine manufacturing, what does this mean?

The aim of this article is to lead readers step-by-step to a better understanding of this platform. 

*****

Gli adenovirus sono stati per decenni ottimi vettori per il rilascio di geni per la terapia genica e antigeni dei vaccini (e questo è ciò che sappiamo come piattaforma vaccinale basata su vettori virali; VV-based).

  • Cosa sono gli adenovirus?
  • Perché li abbiamo scelti per lo sviluppo dei vaccini?
  • Come è stata progettata la prima generazione di vaccini a base di adenovirus?
  • La RCA può essere un problema di sicurezza nella produzione basata su vv, che cos’è?

Questo articolo vuole portare i lettori, passo dopo passo, ad una migliore comprensione di questa tecnica. 

Cosa sono gli adenovirus?

La parola “adeno” viene dal greco “adēn”, e significa “ghiandola”. Nel 1953, l’ adenovirus è stato isolato dalle adenoidi di un bimbo e venne definito un “agente di degenerazione adenoide”, abbreviato in “A.D. agente” (Rowe WP et al.)

Infezioni da Adenovirus

Gli adenovirus causano circa il 5-10% delle malattie respiratorie. Di solito causano infezioni del tratto respiratorio asintomatiche, ma possono essere pericolosi e fatali negli individui immunocompromessi. Le infezioni adenovirali non sono solo respiratorie, ma anche oculari o gastrointestinali e possono colpire una vasta gamma di ospiti (uomini e animali). 

  • Periodo d’incubazione di 3-10gg
  • Possibili riattivazioni in bambini immunodepressi e adulti. 

Faringite febbrile acuta (bambini di 3 anni), Febbre faringo-congiuntivale (7-8 anni). 
Sintomi simili-influenzali quali: congestione nasale, tosse, coriza, malessere, febbre, brividi, mialgia e cefalea) 
Malattia respiratoria acuta (ARD): Febbre, tosse, faringite, adenite cervicale, sierotipi 4, 7 • Polmoniti virali, laringiti, croup, bronchioliti.

 
Sindromi cliniche nei soggetti immunodepressi:
Polmoniti 
Epatiti/pancreatiti fulminanti 
Coliti/gastroenteriti fulminanti 
Cistiti emorragiche 
Encefaliti (rare) (bel pdf: http://www.labanalisibruno.it/files/adenovirus.pdf)


La Struttura 
Le particelle degli adenovirus hanno: 

  • capside icosaedrico 
  • diametro di 70-90 nm 

Le particelle degli adenovirus non hanno involucro lipidico. 


Familia
Adenoviridae (piu’ di 50 sierotipi). 


Il Genoma è DNA lineare a doppio filamento di 26-45 kbp

  • Due ripetizioni terminali invertite (ITR) (rose nell’immagine del genoma, sotto)

 –  Cinque geni precoci (early) (E1A, E1B, E2, E3, E4) che modulano l’espressione genica dell’ospite richiesta per la sintesi e la replicazione della proteina dell’adenovirus.

  • Cinque geni tardivi (L1-5) che sono necessarie per l’assemblaggio, il rilascio e la lisi delle cellule ospiti. 

Perché li abbiamo scelti per lo sviluppo dei vaccini? Pros e Cons


Pros
– un’ampia gamma di tropismo tissutale
– facilità di manipolazione genetica 
– proprietà adiuvanti intrinseche, 
– capacità di indurre robuste cellule T transgene-specifiche e risposte anticorpali
– facilità di produzione su larga scala.


Cons 
– immunità preesistente nell’uomo,
– risposte infiammatorie,
– sequestro del vettore a fegato e milza
– l’emergenza di Replication-Competent Adenovirus (RCA) o pseudo RCA
– molte fasi di produzione aumentano la possibilità di contaminazione

Costruzione di vettori adenovirali
Prima generazione
Come menzionato sopra: immunità preesistente nell’uomo, le risposte infiammatorie, e – sequestro del vettore in fegato e milza hanno limitato l’uso degli adenovirus come vettori. Tuttavia, la scelta di adenovirus meno circolanti e meno infettivi nella popolazione mondiale può risolvere questo problema. Sputnik V usa Ad26 e Ad5. J&J usa Ad26. Oxford/Astrazenca usa Ad dello scimpanzé (ChAdOx1).  
Gli adenovirus sono realizzati per renderli sicuri ed efficienti per l’uso umano come vaccini e vettori di terapia genica. 
Se vacciniamo gli esseri umani con vaccini contenenti vettori adenovirali che hanno ancora la loro capacità di replicarsi (RCA), questo potrebbe diventare un problema di sicurezza. Soprattutto nelle persone immunocompromesse che probabilmente finirebbero con un’infezione adenovirale pericolosa e fatale. 
Il primo gene trascrive prima la proteina E1A, una proteina essenziale per la replicazione virale. La proteina E1A attiva la trascrizione di altri geni virali responsabili della sintesi del DNA virale. 

In altre parole: le copie adenovirali NON possono essere realizzate senza il gene E1 completamente funzionante.


Per questo motivo, nei vettori adenovirali di prima generazione sono stati preparati eliminando il geno E1 (verde) per due cose:

  • Per renderli difettosi nella replicazione e 
  • Per creare spazio per una sequenza transgene (come Spike S dal SARS-CoV-2, rosso).

Questo modello è funzionale come trans-complementazione e consente la replicazione del vettore adenovirale.

Trans-Complementazione che significa? 
L’E1 eliminato da Ad è ingegnerizzato all’interno del cromosoma della cellula (come HEK293, 911, ecc.), e quindi continua ad aiutare il virus a replicarsi senza trovarsi all’interno del proprio genoma virale (come BLUETOOTH-PAIR). (Vedi l’illustrazione).

Purtroppo, non continua sempre come BLUETOOTH-PAIR perché ci sono possibilità di ricombinazione omologa spontanea tra il vettore adenovirale e le regioni E1 durante l’amplificazione all’interno delle cellule HEK293 (zona grigia), che potrebbero consentire l’emergere di vettori adenovirali (RCA) competenti per la replicazione!


Tuttavia, il progresso scientifico ha portato i ricercatori a trovare un bel trucco. Hanno sostituito la parte omologa con altre sequenze come PGK e HBV polyA (PER.C6 cellule come un esempio). Ora, l’evento RCA è quasi molto raro che si verifichi.

Continua …

Era chiaro? E ben spiegato? Guarda cosa ha detto la gente

Il coronavirus NON è UGUALE al virus influenzale!


https://www.facebook.com/groups/influenzasconosciuta/permalink/1804148473086983/

Uno degli argomenti più comuni che ascoltiamo da mesi e mesi è:

il coronavirus è UGUALE al virus influenzale!

Infatti, ci sono tante differenze tra il corona e il flu a tanti livelli:

PART I

Etimologia e Storia

Le prime informazioni su presunte pandemie sono difficili da raccogliere. Mentre, ci sono rapporti antichi risalenti al tempo di Ippocrato che descrivono “malattie altamente contagiose” in Grecia intorno al 410 aC, e altri diversi rapporti del medioevo menzionano anche molti eventi di “peste”, PERÒ nessun rapporto può essere conclusivo per la mancanza delle evidenze scientifiche (per esempio evidenza del genoma del virus, i tessuti … ecc).

La parola “influenza” venne descritta inizialmente nel 1357 a Firenze -in Italia- per suggerire che l’astronomia, cioè la congiunzioni di stelle e pianeti, potrebbe influenzare lo stato di salute (influenza di stelle), insieme al raffreddore (influenza di freddo) – (cit. http://www.academia.dk/…/PDF/Paleomicrobiology/12.pdf)

Gli storici della medicina, probabilmente, non sarebbero mai sicuri che tutte le pandemie “influenzali” documentate prima del 1918 fossero dovute al virus dell’influenza piuttosto che a un vecchio coronavirus. Per esempio una ricerca da KU Leuven ha ipotizzato che

la pandemia del 1889-1891 potrebbe essere stata il risultato della trasmissione interspecie di coronavirus bovini all’uomo, con conseguente comparsa di HCoV-OC43 (e non virus influenzale).

(link: https://rega.kuleuven.be/…/complete-genomic-sequence.pdf)

*

1918-1919 pandemia influenzale (H1N1) – “Influenza spagnola”

1957-1958 pandemia influenzale A (H2N2) – “influenza asiática”

1968-1969 pandemia influenzale (H3N2) – “influenza di Hong Kong”

1977-1979 – pandemia influenzale (H1N1) – “influenza russa”

2009 pandemia influenzale ((H1N1) – “pandemia di influenza suina”

In un altro capitolo, il significato di H e N verrà spiegato chiaramente. Rimanete sintonizzati.

*

Gli incredibili 46 anni trascorsi a scavare la neve ad Alaska per identificare l’agente responsabile dell’influenza spagnola sono qualcosa che li ho rappresentati in un fumetto. Non sono sicura se vale la pena tradurre in italiano. Fammi sapere.

Ora, finiamo il giro storicoe prendiamo l’autostrada della virologia (vedi la foto).

****** Continua la prossima settimana *********

*** Per favore, se hai notato errori di battitura o grammaticali, fammelo sapere. GRAZIE!

Have you read the previous post? AZ vs. J&J? NO? Click here to read

Il Vaccino J&J NON è Lo Stesso come Sputnik ed AZ


https://www.facebook.com/groups/influenzasconosciuta/permalink/1796597677175396/

Leggo spesso che molte persone scrivono:

“Il vaccino J&J è lo stesso come Sputnik ed AZ”.

No, non è lo stesso. La differenza principale è che J&J esprime la protiena Spike MODIFICATA, mentre AZ e Sputnik non hanno modificato loro proteina Spike (S)

COSA SIGNIFICA?

Prima di tutto, cominciamo a capire pochi punti:

Perché la proteina Spike (ma nient’altro?)

La proteina spike S di SARS-CoV-2 è stata selezionata all’inizio come obiettivo per lo sviluppo del #COVID19Vaccino, sulla base dell’esperienza con SARS-CoV e MERS-CoV. S del coronavirus è nota per essere relativamente labile e, oltre a questa proprietà intrinseca, la spike SARS-CoV-2 contiene anche un sito di scissione polibasica tra S1 e S2.

Cosa è Il sito di scissione polibasica tra S1 e S2?

Il sito di scissione polibasica è un sito di escissione proteolitica utilizzato da proteasi cellulari che attivano un’ampia gamma di proteine ​​precursori. L’acquisizione di un sito di clivaggio polibasico (CS) è associata a patogenicità virale. Sono note anche varie proteasi cellulari come furina che catalizzano il processo di attivazione proteolitica per scindere varie proteine ​​della superficie cellulare virale, necessarie per l’ingresso virale nelle cellule ospiti.Nella ricerca dell’influenza virus, i ricercatori hanno notato che la rimozione dei siti di scissione polibasica ha dimostrato di stabilizzare le proteine dell’emoagglutinina (HA) dei virus influenzali altamente patogeni.Il lavoro su SARS-CoV-1 e MERS CoV aveva dimostrato lo stesso. Non solo così ma anche che l’introduzione di due proline (+PP) nelle posizioni 986 e 987 del SARS-CoV-2 migliora la stabilità e l’espressione.

Sito di scissione polibasica in SARS-CoV-2

La proteina spike svolge un ruolo fondamentale nel legare il virus al recettore della cellula ospite (enzima di conversione dell’angiotensina 2, ACE2) e successivamente nel mediare l’ingresso virale attraverso la fusione della membrana. La furina riconosce un sito di scissione polibasica e scinde la proteina spike durante l’ingresso del virus negli endosomi. Il sito di scissione polibasica viene generato come risultato dell’inserimento di 12 nucleotidi, che successivamente si traduce nella prevista acquisizione di 3 glicani intorno al sito. Questa particolare caratteristica non è presente nelle proteine ​​spike di altri coronavirus, inclusi il coronavirus di pipistrello e SARS-CoV.

Come i ricercatori hanno usato questa characteristica per studiare l’effetto degli elementi stabilizzanti su l’immunogenicità della proteina spike?

Molti studi in quest’area, compresi quelli che utilizzano versioni mutate di SARS-CoV-2 con siti di clivaggio polibasico PRAR cancellati (ΔCS) o mutati con due proline (+PP).

Questo funziona perché la **Prolina è un amminoacido molto solido. È un po **come una stecca** che stabilizza la proteina nella condizione di cui abbiamo bisogno per mostrare il sistema immunitario.

É stata ipotizzata che la rimozione del sito possa rendere la proteina più stabile in vivo dopo la vaccinazione (Krammer F, et al. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33653892/). Una stabilità più lunga potrebbe portare a risposte immunitarie più forti e potenzialmente più uniformi. La combinazione dell’eliminazione del sito di scissione polibasica e dell’introduzione delle mutazioni PP (ΔCS+PP) ha dato i migliori risultati.

Allora, non tutti i vaccini sono “tecnicamente” uguali, giusto?

Si. Non sono uguali. I candidati vector-virali vaccini: ChAdOx sviluppato da AstraZeneca e Sputnik V utilizzano una versione wild type (non-modificata) della proteina spike, mentre il vaccino mRNA di Moderna e Pfizer usa un costrutto di spike che include le mutazioni PP ma presenta un sito di clivaggio wild-type.J&J e Novavax utilizzano un costrutto spike ricombinante ΔCS+PP.